Odpowiedz w wątku  [ Posty: 9 ] 
wytrącanie dna 
Autor Wiadomość
Avatar użytkownika

Dołączył(a): 21 paź 2005, o 21:12
Posty: 12
Post wytrącanie dna
oto sposub wytrącania DNA cebuli:


DNA jest to kwas deoksyrybonukleinowy czyli cząsteczka która posiada zakodowaną informacje genetyczną. DNA zbudowany jest z deoksyrybonukleotydów. DNA posiadają wszystkie organizmy żywe oraz tzw. twory - na przykład wirusy.
Doświadczenie rozpoczynamy od włożenia etanolu (spirytusu) do zamrażalki (etanol nie zamrozi się). Denaturatu nie możemy używać ponieważ jest on zanieczyszczony (między innymi purynami i pirydynami) i nukleokwasy zawarte w DNA będą z zanieczyszczeniami denaturatu, mogą powstawać różnorodne związki. No więc jak już włożyliśmy etanol do zamrażalki to w około 150ml wody rozpuszczamy łyżeczkę soli kuchennej (chlorku sodu, NaCl) i mieszamy do całkowitego rozpuszczenia.



Do osobnego naczynia (np. zlewki) wlewamy 10ml płynu do mycia naczyń i ostrożnie wlewamy do niego po ściance wodę z rozpuszczoną solą kuchenną.



Teraz siekamy jedna średnią cebulę i powoli wrzucamy do zlewki z roztworem.



Całość ogrzewamy przez około 10 minut (nad ogniem lub łaźnię wodną).



Zlewkę chłodzimy do temperatury pokojowej i energicznie mieszamy lub miksujemy - wszystko robimy przez jedną chwilę, nie pozwalamy aby całość spieniła się. Teraz bierzemy lejek i możemy sobie ułatwić lub utrudnić życie :) To znaczy jeśli weźmiemy lejek o wąskim otworze (np. lejek karbowany) przez który leci ciecz to możemy bezpośrednio przelać roztwór z cebulą na lejek bez używania filtr/sączka, ale pod warunkiem że cebula przez niego nie przelatuje. No ale jeśli nie mamy takiego lejka to przesączmy na sączku czy filtrze.



Przesącz przelewamy do mniejszych naczyń i powoli po ściance lejemy zmrożony etanol. Powstaną dwie warstwy. Jedna mętna a druga klarowna (spirytus). Po chwili zacznie wytrącać się DNA z cebuli.



Źródło: - http://malutki.vitnet.pl/viewtopic.php?t=815

Wziołem to z chemik vitnet z działu doświadczenia... teraz juz nie plagiat:)

A wie ktoś moze jak wytrącić DNA z komurk izwierzęcej czy coś w tym stylu?
Błagam o pomoc. :wink:


Ostatnio edytowano 11 sty 2006, o 23:21 przez miko13, łącznie edytowano 1 raz



11 sty 2006, o 21:42
Zobacz profil
Avatar użytkownika

Dołączył(a): 15 lis 2005, o 20:57
Posty: 40
Lokalizacja: z nienacka:)
Post 
Czy to nie plagiat??

http://chemik.vitnet.pl/articles.php?id=102

_________________
Obrazek


11 sty 2006, o 23:12
Zobacz profil
Avatar użytkownika

Dołączył(a): 21 paź 2005, o 21:12
Posty: 12
Post lol?
No przeciez napisałem z kąd to jest ;p.
No moze troszke niedokładnie ale zaraz poprawie:)


11 sty 2006, o 23:20
Zobacz profil
Avatar użytkownika

Dołączył(a): 21 paź 2005, o 21:12
Posty: 12
Post DNA
A to moze ktoś wie jak to zrobić aby wytrącić DNA z komurk izwierzęcej??;p


12 sty 2006, o 09:59
Zobacz profil
*******
Avatar użytkownika

Dołączył(a): 21 cze 2005, o 17:00
Posty: 1595
Lokalizacja: Skoczów
Post 
procedury są opisane w podręcznikach do biochemii, polecam ci skrypt: "Ćwiczenia z biochemii" pod redakcją L. Kłyszejko-Stefanowicz,
używa się tam chyba związków baru, EDTA i czegoś tam, natomiat sam materiał z którego wytrącamy kwasy nukleinowe musi być shomogenizowany :)

_________________
Sprzedam wodorotlenek sulfurylu SO2(OH)2, również w postaci r-rów o żądanym stężeniu. Cena do negocjacji.

Obrazek
weź udział:


12 sty 2006, o 15:55
Zobacz profil
Post 
Chcesz DNA z kom. zwierzęcej ?? Ok. Więc......

Zawodowo sie to robi tak:
Najpierw kawałek mięsa razem z płynem homogenizującym homogenizujesz.... Następnie dodajesz detergentu i roztwory proteazy. Wtedy uwalnia sie DNA i następuje trawienie bialek. Następnie dodajesz fenol. Zdenaturuje on niestrawione białka. Powstanie ci ( idąc od dołu) fenol, białka( zdenaturowane) i wodny r-r DNA. Zlewasz go i dodajesz np. etanolu. Wytrącają ci się pikne niteczki DNA.

Poszukaj sobie na forum o wytrącaniu dna z cebuli ( tam masz jak wytrącic dna domowymi sposobami)


12 sty 2006, o 17:53
Avatar użytkownika

Dołączył(a): 21 paź 2005, o 21:12
Posty: 12
Post HOmogenizacja
A co to jest ten płyn homogenizujacy?? ;p
Bo nie wiem...;]


25 sty 2006, o 10:12
Zobacz profil
@MODERATOR
Avatar użytkownika

Dołączył(a): 16 sty 2006, o 19:24
Posty: 868
Lokalizacja: Opole
Post 
Pewnie coś co ma zniszczyć błonę komórkową :) Błona skłąda się z fosfolipidów i białek, nie wiem czym to przerwać.. Za to zrobiłem wersję z cebulą, wyszło mi coś takiego: http://jaozyrys.webd.pl/images/dna1.jpg


25 sty 2006, o 18:25
Zobacz profil
Post 
Dokładnie, homogenizacja ma na celu rozbicie komórki, czyli rozbicie błony komórkowej i ściany komórkowej, jeśli takowa jest obecna.

A płyn homogenizujący... hmmm... Czy nie aby roztwór sacharozy (0,25-0,32 M) buforowany przy odpowiednim pH, w którym umieszcza się próbkę komórek?


25 sty 2006, o 18:46
Wyświetl posty nie starsze niż:  Sortuj wg  
Odpowiedz w wątku   [ Posty: 9 ] 

Kto przegląda forum

Użytkownicy przeglądający ten dział: Brak zidentyfikowanych użytkowników i 13 gości


Nie możesz rozpoczynać nowych wątków
Nie możesz odpowiadać w wątkach
Nie możesz edytować swoich postów
Nie możesz usuwać swoich postów
Nie możesz dodawać załączników

Szukaj:
Multumiri adresate phpBB.com & phpBB.ro..
Design creat de Florea Cosmin Ionut.
© 2011

..