Dołączył(a): 12 gru 2005, o 22:33 Posty: 608 Lokalizacja: Poznań
Wykrywanie wiązania peptydowego w N-Boc-peptydach
Posiadam bibliotekę N-Boc-di- i tripeptydów. Muszę je oczyścić chromatograficznie i stąd moje pytanie; jakimi odczynnikami mogę uwidocznić je na płytce TLC w postaci wolnej i zabezpieczonej t-butoksykarbonylem (Boc-) na N-końcu? Ninhydryna sobie chyba nie poradzi ze wszystkim ze względu na zablokowana gr. aminową Boc-pochodnych, wiec może jakieś inne propozycje?
_________________ Chemik nie upija się, tylko zwiększa labilność konformacyjną.
A poza tym wszystko jest dla ludzi... z głową!
15 wrz 2009, o 18:02
adam31415
*****
Dołączył(a): 19 lis 2007, o 18:58 Posty: 138 Lokalizacja: Uć
Może najpierw kwas (HCl) a potem ninhydryna.
Część (zawierająca aminokwasy aromatyczne) może świecić pod lampą UV
15 wrz 2009, o 18:38
Arion
***
Dołączył(a): 12 gru 2005, o 22:33 Posty: 608 Lokalizacja: Poznań
Ok, ale aromatycznych będzie 5-6 z ponad 30! A co do kwasu to mam rozwiniętą płytkę do stęż. HCl zanurzyć? Przecież mi zeżre płytkę (SiO<sub>2</sub> na Al) . Myślałem nad wybarwianiem stęż H<sub>2</sub>SO<sub>4</sub> na gorąco, albo jodem. Co o tym sądzisz?
_________________ Chemik nie upija się, tylko zwiększa labilność konformacyjną.
A poza tym wszystko jest dla ludzi... z głową!
15 wrz 2009, o 22:50
adam31415
*****
Dołączył(a): 19 lis 2007, o 18:58 Posty: 138 Lokalizacja: Uć
Jak zanurzysz płytkę na chwilę w stęż. HCl a potem podgrzejesz suszarką to nic nie powinno się stać z płytką. Reakcja z ninhydryną jest na tyle czuła że może się udać tak wywołać płytkę.
Ja w pierwszej kolejności spróbowałbym zrobić tak.
Jod może być dobry, ale też nie do wszystkich aminokwasów.
16 wrz 2009, o 00:00
C4
****
Dołączył(a): 27 lut 2004, o 16:02 Posty: 68 Lokalizacja: centralna Polska
To się robi tak:
Robisz roztówr 100mg ninhydryny w 50ml MeOH i dodajesz dwie krople lodowatego kwasu octowego.
Płytke zanurzasz szybko w roztworze, wyciągasz i wygrzewasz heatgun'em
Boc i tak spada w 40C więc się wszystko pieknie wybarwi tyle, że nie tak intensywnie jak wolna amina(to i nawet lepiej bo nie będzie smug), musisz wygrzać płytke, tak z wyczuciem, po paru próbach zobaczysz o co chodzi:-)
_________________ <<C4>>
25 wrz 2009, o 22:38
sativ
Zasłużony dla forum
Dołączył(a): 1 lut 2005, o 21:11 Posty: 931 Lokalizacja: Poznań
Opcją którą stosowałem jest też "partyzant"- rr ninhydryny w EtOH, maczasz płytkę, nie pozwalasz za bardzo ścieknąć [ale bez przesady] i podpalasz zapalniczką. Heatguna jak się domyślam raczej nie masz
Użytkownicy przeglądający ten dział: Brak zidentyfikowanych użytkowników i 21 gości
Nie możesz rozpoczynać nowych wątków Nie możesz odpowiadać w wątkach Nie możesz edytować swoich postów Nie możesz usuwać swoich postów Nie możesz dodawać załączników
. Myślałem nad wybarwianiem stęż H<sub>2</sub>SO<sub>4</sub> na gorąco, albo jodem. Co o tym sądzisz?
