Witam,
Jestem na 1 roku Biotech, muszę napisać sprawozdanie a nie mam pojęcia jak się do niego zabrać. Bardzo proszę o pomoc, a zwłaszcza o wytłumaczenie mi jak na podstawie zebranych danych mogę wyznaczyć pK (ujemny logarytm stałej dysocjacji) dla czerwieni fenolowej?

oto doświadczenie:
10.4.2.2. Wpływ pH na parametry spektralne związków chemicznych
Ćwiczenie ma na celu przedstawienie w jaki sposób pH może wpływać na właściwości spektralne związków chemicznych, szczególnie dla wskaźników kwasowo-zasadowych, których przykładem jest czerwień fenolowa
Postępowanie
1. Przygotować 10ml 0.1%(w/w) roztworu czerwieni fenolowej. ( nie mieliśmy w laboratorium takiego roztworu, nie dostałam też substratów do jego zrobienia, musiałam korzystać z roztworu 0.05%- prowadząca powiedziała mi żeby po prostu użyła jej 2x więcej, tak też zrobiłam)
2. W probówkach, na podstawie tabeli, sporządzić następujące układy pomiarowe:

(przepraszam, że taki krzywy skan)
3. Przed przystąpieniem do pomiarów należy ustawić wartość absorpcji przy długości fali od 300 do 800nm, wskazywaną przez spektrofotometr na 0(zerowanie aparatu). <-- Nie było nam dane samodzielnie ustawiać aparatu, zrobiła to za nas prowadzący, długość fali od 350-750nm, mierzone co 2nm, na wydruku wartość podana co 8 nm.
4. Zmierzyć za pomocą spektrofotometru absorpcję w zakresie od 300 do 800 nm dla każdej przygotowanej próby.
Opracowanie wyników
1. Wyznaczyć długość fali przy jakich punkty krzywe tworzą punkty izobestyczne.
2. Wkreśl krzywą zależności absorbancji przy 615 nm od pH, określ w jakim punkcie tej krzywej połowa związku występuje w formie zasadowej a jaka w kwasowej< mi kazano zrobić dla max absorpcji taki wykres
3. Wyznacz pK(ujemny logarytm stałej dysocjacji<-- domyślam się, że chodzi o log dziesiętny) dla czerwieni fenolowej.

wydruki z pomiarów(3 drukarka przy spektrofotometrze trochę mi ucięła, musiałam chyba za daleko kartkę wsunąć:():
http://w621.wrzuta.pl/obraz/9JyZ6zZCeHR/1
http://w621.wrzuta.pl/obraz/0l2d6fT1u8D/2
http://w621.wrzuta.pl/obraz/3DG7Fa6Dq07/3
http://w621.wrzuta.pl/obraz/6d9xk3tnZsz/4
http://w621.wrzuta.pl/obraz/92oIIpBej4j/5
http://w621.wrzuta.pl/obraz/3RspdnxrQKb/6
http://w621.wrzuta.pl/obraz/37N1cZeqPqf/7
http://w621.wrzuta.pl/obraz/0D03h0FaM9F/8

Co do robienia sprawozdania to mam tyle:

http://w784.wrzuta.pl/plik/9Ke0tv5jBXz/ ... ykdwomawin

Z tego co zrozumiałam to w punkcie 1 chodzi o fale w zakresie od około 637-750 nm? tam gdzie na siebie nachodzą to są punkty izobestyczne czy jest może jakiś wzór bądź prawo które pozwala wyznaczyć takie punkty?

Co do pkt 2 to wykres jest na 4 arkuszu w linku powyżej. Jak można określić kiedy połowa związku jest w formie zasadowej a połowa w kwasowej? jakoś w oparciu o pH? Jeżeli chodzi o pkt 3 to leżę i kwiczę, nie wiem jak to zrobić? Znalazłam co prawda podobne zadanie dla innego wskażnika le tam było jedynie napisane" wyznacz graficznie pK dla wskaźnika", jeżeli ktoś wie jak to się robi to będę bardzo wdzięczna jeżeli w jak najprostszych słowach mi to opisze.
Z góry dziękuję za pomoc, wiem że proszę o dużo ale naprawdę nie wiem co z tym dalej zrobić:(
Pozdrawiam

Wiesz, skoro już masz wpisane te dane z analizy do excela, to zrób sobie wykresy absorbancji od długości fali.
Zauważ, że spełniona jest zależność pH = pKa + log([Z(in)]/[K(in)] Z(in) - forma zasadowa wskaźnika, K(in) - forma kwasowa. Ponieważ wskaźnik ma małe stężenie, pomijamy jego wpływ na pH i uznajemy, że to logarytm ze stosunku stężeń formy zasadowej i kwasowej zależy od pH.
Mając wykresy, możemy określić stężenie molowe odpowiednich form (zabarwienie), dysponując odpowiednim współczynnikiem absorpcji - wybieramy absorbancję albo w maksimum absorpcji, albo w punkcie, w którym druga forma nie absorbuje.

Więc liczysz stężenia i podstawiasz do wzoru: pKa = pH - log([Z(in)]/[K(in)]. Uzyskasz 8 wyników, z których robisz średnią i voila.

Dzięki bardzo za pomoc:) sądzę, że dalej już sobie poradzę.